表1稀釋倍數(shù)與吸光度A的關(guān)系
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根據(jù)文獻(xiàn)[6]可知,Lg(A)和稀釋倍數(shù)成線性關(guān)系,經(jīng)作圖計(jì)算可得線性方程:Lg(A)=-1.9314+0.00493n。根據(jù)白磁板法標(biāo)準(zhǔn)色在660nm處的吸光度值A(chǔ)為0.300,可以推得當(dāng)稀釋倍數(shù)為285.7倍時(shí)酶解5min后,吸光度值為0.300,再按照文獻(xiàn)[8]可以計(jì)算原淀粉酶的活力為22856U/mL。
同理,Lg(A)和測(cè)試酶液濃度成線性關(guān)系,經(jīng)作圖可得線性方程:Lg(A)=1.1996-0.02123C。
定義1mL酶液(或1g固體酶粉)在pH6.0,中溫50℃,1min液化可溶性淀粉1mg所需的酶量稱(chēng)為一個(gè)酶活力單位,以U/mL表示,則可得淀粉酶活力測(cè)定經(jīng)驗(yàn)公式:
酶活力單位=![]()
為了保證測(cè)定結(jié)果的準(zhǔn)確性,應(yīng)控制稀釋酶液中酶活力為60~100單位為宜[6],因此本試驗(yàn)中將原酶液稀釋300倍備用。
3.2超聲波預(yù)處理對(duì)淀粉酶活力的影響
分別取稀釋酶液10mL放入50℃的水浴鍋中與50℃的超聲波水浴中,預(yù)處理15min后取出。按(2.1)測(cè)定兩種方法預(yù)處理后淀粉酶的活力,每種方法分別測(cè)定5次,其結(jié)果記錄如表2。
表2超聲波預(yù)處理對(duì)酶活力的影響
由表2可知,淀粉酶在超聲波中預(yù)處理15min后,其活力較水浴鍋中保溫15min后有9.4%的提高。
3.3超聲波條件下酶解對(duì)淀粉酶活力的影響
分別取10個(gè)燒杯,按(2.1)加入可溶性淀粉溶液、緩沖液和稀釋淀粉酶液1mL,計(jì)時(shí)搖勻,將其中5個(gè)燒杯放入50℃水浴鍋中酶解5min,另外5個(gè)燒杯放入50℃的超聲波中酶解5min,然后繼續(xù)按(2.1)操作步驟,分別測(cè)定吸光度值。測(cè)定結(jié)果記錄如表3。
表3超聲波條件下酶解對(duì)淀粉酶活力的影響
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從表3可知,在超聲波條件下發(fā)生酶解反應(yīng),淀粉酶活力測(cè)定結(jié)果比常規(guī)方法提高了近21.7%,這一結(jié)果與超聲波預(yù)處理后淀粉酶活力的提高相比較,提高程度更明顯。
據(jù)此可以推斷,超聲波對(duì)淀粉酶退漿工藝的促進(jìn)作用的機(jī)理至少有兩個(gè)方面:一方面是在超聲波條件下,淀粉酶本身的活力得到提高,促進(jìn)了淀粉酶的退漿工藝;另一方面則可能在于超聲波、酶分子和織物相互之間的其它物理和化學(xué)作用[1]。
3.4超聲波條件下影響淀粉酶活力提高的因素分析
3.4.1pH值對(duì)超聲波預(yù)處理淀粉酶活力的影響
分別配制pH值為5.0,5.5,6.0,6.5,7.0的磷酸氫二鈉-檸檬酸緩沖溶液,只改變緩沖體系,其余按(3.2)試驗(yàn),比較在不同pH值條件下超聲波預(yù)處理對(duì)淀粉酶活力測(cè)定結(jié)果的影響,測(cè)定結(jié)果記錄如表4。
表4pH值對(duì)超聲波預(yù)處理淀粉酶活力測(cè)定結(jié)果的影響
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從表4結(jié)果可知,超聲波預(yù)處理和僅在水浴鍋保溫處理的淀粉酶其活力測(cè)定結(jié)果都隨pH值的降低而逐漸增大,這可能與酸性條件有利于淀粉的降解有關(guān)。另外經(jīng)超聲波預(yù)處理的淀粉酶其活力測(cè)定結(jié)果都比僅在水浴鍋保溫處理的要高,這一結(jié)果與(3.2)的結(jié)論是一致的。考慮到淀粉酶的退漿工藝一般都在pH 6.0左右,因此本文其它的試驗(yàn)都采用pH6.0的緩沖體系。
3.4.2處理時(shí)間對(duì)超聲波預(yù)處理淀粉酶活力的影響
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