酸性紅B脫色優勢菌的篩選將富集培養好的染料脫色菌,涂布于肉湯蛋白胨培養基平板上,30e恒溫培養箱中培養24h.根據菌落形成的透明圈挑選出具有脫色能力的菌株。將挑選出來的菌在肉湯蛋白胨液體培養基中進行純培養。取1mL培養液接入5mL含酸性紅B(濃度為0.1g/L)的富集培養液中。靜置培養24h后,測定每株菌脫色能力,從中篩選出脫色能力強的菌株,視為優勢菌。
脫色能力的測定細菌脫色能力用比色法測定。把含酸性紅B的培養液經3000r/m,離心20min后,取上清液在酸性紅B的最大吸收峰(518nm)處測定OD值。以未接菌的液體培養基為對照,計算脫色率(D)。
酸性紅B脫色優勢菌生長曲線的測定取菌種于肉湯蛋白胨液體培養基中靜止培養12h.此菌液為測定時所用種子培養液。取1mL種子培養液于小試管中,充分搖勻。測定剛接種的培養液OD值(430nm),以未接種的培養液作為空白。每隔一段時間取一只試管測OD值。根據測定結果繪制光吸收)培養時間(OD)T)曲線。
酸性紅B脫色優勢菌活菌數)光吸收(N)OD)標準曲線的測定從斜面固體培養基上挑取一環菌,接種到液體活化培養基中培養。每隔一段時間取出培養物,用比色法測定其吸光度。并進行涂布記數。根據記數結果繪制活菌數)光吸收(N)OD)標準曲線。
酸性紅B脫色優勢菌的初步鑒定對分離、篩選出的酸性紅B脫色優勢菌按照一般常用的細菌鑒定方法手冊和有關的指導<910>進行初步鑒定。酸性紅B脫色優勢菌脫色條件的優化選擇影響酸性紅B脫色優勢菌脫色效率的溫度、pH.、時間三種因素,各因素選擇五個水平,設計正交實驗<11>進行脫色條件優化的研究。正交實驗因素及水平。
結果從黃河河土樣品中分離、篩選得到一株酸性紅B脫色優勢菌,24h脫色率為51.5%.命名為DRBD-6.DRBD-6的N)OD標準曲線對DRBD-6進行連續培養,測得的數據進行線性回歸分析,得出該菌株的N)OD標準曲線,見1.DRBD-6菌株N)OD標準曲線2.2DRBD-6生長曲線DRBD-6生長曲線至穩定期如示。
DRBD-6的鑒定結果個體形態及染色觀察該菌在肉湯蛋白胨培養基平板上的菌落為圓形,隆起,邊緣整齊,表面光滑,乳脂色,稍透明。個體形態為桿狀,大小1.0-1.5@1.5Lm,排列方式成對和短鏈為主。芽孢染色陰性,鞭毛染色陰性,革蘭氏染色陰性。
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