厲成宣,范雪榮,王 強,王欽清(江南大學生態紡織教育部重點實驗室,江蘇無錫214122)
O 前言 生物酶具有催化專一、高效和反應條件溫和等特點,在發酵工業、制藥、生物傳感器、紡織印染等領域正發揮著越來越大的作用。然而,由于游離態酶對環境變化十分敏感,且反應后不能回收,在一定程度上限制了其應用發展。研究發現,將酶固定在合適的載體上就有可能解決上述問題,因此,對酶進行固定化是酶工程研究的核心內容之一。過氧化氫酶(Catalase)能夠快速、高效地催化分解過氧化氫,目前主要應用于紡織品的生物除氧、生物傳感器、原料奶保鮮和廢水處理等方面。國內外學者對于過氧化氫酶的固定化作了大量的研究,已經報道的固定化材料有無機材料(礬土、硅酸鎂、磁體礦)和有機材料(殼聚糖、絲素蛋白、纖維素)等。 二醛基纖維素是纖維素衍生物的一種,具有良好的生物相容性、生物可降解性、環境友好和無毒等特點。目前,關于二醛基纖維素固定化葡萄糖氧化酶、固定化血紅蛋白和固定化脂肪酶的研究已有一定進展,固定化過氧化氫酶則尚未見報道。本課題主要利用棉織物與高碘酸鈉發生選擇性氧化反應生成2,3-二醛基纖維素,并以其為載體,通過纖維素上氧化產生的醛基與酶蛋白上的氨基發生交聯反應,以固定過氧化氫酶。1 試驗1.1材料和儀器 織物14.5 tex×14.5 tex 524根/10 cm x 284根/10 cm純棉平紋漂白織物 試劑過氧化氫酶(酶活40 000 U/mL,諾維信生物技術有限公司,工業品),高碘酸鈉、30%過氧化氫、鹽酸羥胺、氫氧化鈉、百里香酚藍、丙三醇、甲醇(均為分析純) 儀器uV-2280型紫外.可見分光光度計,PHS-2C型酸度計,WHYF-2F型全封閉水浴恒溫振蕩器1.2載體制備 將1.00g漂白棉織物浸入20 mL 0.05~0.20 mol/L的NaIO。溶液中,置于全封閉水浴恒溫振蕩器中,于2
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