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利用微生物產生的纖維素酶將纖維素糖化，再經發酵轉化成燃料乙醇，不僅可以充分利用生物質資源．更重要的是可以緩解化石能源短缺帶來的全球性能源危機。

產纖維素酶的微生物主要是真菌中的木霉和曲霉，但這類菌的最大缺點就是Β-葡萄糖苷酶的產量和活力很低．而且對葡萄糖的耐受性也很差。在纖維素分解過程中，由葡聚糖內切酶和葡聚糖外切酶轉化生成的纖維二糖若不能被一葡萄糖苷酶及時地轉化為葡萄糖，就很容易形成產物積累．在濃度較高時就會抑制纖維素酶的合成。這也是利用木霉等真菌菌株工業化生產纖維素酶產量或酶活偏低、生產成本偏高的主要原因。

本實驗室保藏的Z28是一株纖維素酶高產菌，是一株罕見的肉座菌(Hypocreasp．)，其Β-葡萄糖苷酶活力相當高。本研究對Z28的最佳生長及產纖維素酶的液體發酵工藝進行了研究，以期為將來的工業化推廣應用提供理論依據。

1試驗內容

1．1試驗材料

菌種Z28由本實驗室保藏；pNPG(對硝基酚一B—D一葡萄糖苷)購自Sigma公司；Whatmanl號定性濾紙購自廣州捷倍思生物科技有限公司：綠色木霉(Trichodemaviride)AS3．2774和AS3．3002由中科院微生物所菌種保藏中心提供。

1．2試驗用培養基

生長培養基：20g葡萄糖，2g(NH4)2S04，2gKH2P04，0．3gMgSO4·7H20，0．3gCaC12，5mgFeS O4.H2O，1．6mgMnSO4，1．7mgZnC12，l000mL水。

種子培養基(PDA)：20g葡萄糖，l000mL馬鈴薯浸汁，pH值不做調節。

產酶培養基：2gKH2PO4，2．5g(NH4)2S04，0-3gM04·7H20，0．3gCaC12，5mgFeSO4·7H2O，1．6mgMnSO4，1．7mgZnC12，1．7mgCOC12，lmLTween一20，2g稻稈和麥稈，l000mL水。

1.3試驗方法

1.3.1細菌干重的測定

將菌體培養液過濾后得到的菌絲置于80℃烘箱中烘干至恒重后稱取質量。

1．3．2玎維豢的制箭

將在PDA上培養3d的種子液按2％的接種量接種到產酶培養基上，在溫度為30℃，轉速為160r/min的條件下發酵5d，離心發酵液，取其上清液作為試驗酶液。