1.3.3紆維系的測定
CMC酶活的測定:取適當稀釋酶液0.5mL,加入2%的CMC—Na溶液lmL(以pH=5.0,0.2mol/L醋酸緩沖液配制),在50℃恒溫水浴中反應(yīng)30min.用DNS法測定還原糖量。
濾紙酶活(FPA)測定:取適當稀釋酶液0.5mL,加入pH=5.0,0.2mol/L醋酸緩沖液lmL,再加入Whatmanl號定性濾紙l條(6cmxlcm,約50mg),在50℃恒溫水浴中反應(yīng)60min,用DNS法測定還原糖量。
Β-葡萄糖苷酶酶活測定:取適當稀釋酶液0.5mL,加入pH=5.0,0.2mol/L醋酸緩沖液1.5mL,再加入2mmo~L的pNPG溶液(用pH=5.0,0.2mol/L的醋酸緩沖液配制)4mL,在50℃恒溫水浴中反應(yīng)10min。加入0.5mol/LNa2CO3溶液4mL,終止反應(yīng)后在分光光度計上于400nm處檢測生成的對硝基酚量。
酶單位:把lmL酶液每小時產(chǎn)生1umol底物(以葡萄糖或?qū)ο趸佑?的酶量定義為1個活力單位(U/mL)。
2 Z28生長正交試驗
2.1試驗設(shè)計
碳源(A)、氮源(B)、pH值(C)和時間(D)都是影響菌體生長的重要因素,每個因子選擇3個水平,在溫度為30℃,轉(zhuǎn)速為160r/min條件下進行試驗(表1)。

2 2 試驗結(jié)果與分析
試驗結(jié)果見表2 。

由表2可知,在A3B1C1D2條件下,Z28生長最好。影響Z28生長因子的主次順序:碳源>時間>氮源>pH值。碳源是影響Z28生長的最重要因素,繼續(xù)提高碳含量,降低氮含量(提高C/N),更有利于Z28的生長;偏酸性的pH值對Z28生長影響不大,這說明適于Z28生長的pH值較廣,有利于工業(yè)應(yīng)用。
3 Z28產(chǎn)酶正交試驗
3.1試驗設(shè)計
碳源(A)、供氧量(B)、時間(C)和表面活性劑(D)對真菌產(chǎn)纖維素酶能力有重要影響。碳源為不同比例的稻稈粉與麥稈粉的混合物,供氧量以裝液量來衡量。每個因子選擇3個水平進行產(chǎn)纖維素酶正交試驗(表3)。

3.2試驗結(jié)果
根據(jù)表3選擇適當因子的水平組合,進行9組試驗。結(jié)果見表4。

3.3試驗分析
采用極差分析法處理正交試驗數(shù)據(jù)。結(jié)果見圖1和表5。在A1B1C2D1條件下。Z28產(chǎn)纖維素酶能力最強,繼續(xù)減少表面活性劑。增加供氧量可提高Z28纖維素酶各組分的活力。各個因子對纖維素酶各組分誘導(dǎo)能力不同。對CMCase。FPA和Β-葡萄糖苷酶的具體影響有所差異。

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