1.2.3.2精密度考察。精密吸取標準品溶液10ul重復進樣5次,測定峰面積,計算得峰面積相對標準偏差(RSD)值。
1.2.3.3穩定性考察。取棉團鐵線蓮根藥材粗粉按1.2.2制備成樣品,在室溫下保存,分別于第0、2、4、8、12h測定,計算峰面積RSD值。
1.2.3.4重現性考察。取棉團鐵線蓮根樣品5份,分別按1.2.1中色譜條件測定,計算樣品中齊墩果酸峰面積RSD值。
1.2.3.5加樣回收率試驗。精密稱定5.0g棉團鐵線蓮根樣品各5份,分別按供試品溶液方法制備。精密吸取樣品液1m,l在每份中加入齊墩果酸標準品0.2052mg/ml各1m,l進樣分析,計算平均回收率和RSD值。
1.2.4樣品含量測定。分別取棉團鐵線蓮根、莖葉供試品溶液進行HPLC測定,進樣量均為10,l平行進樣3次,計算齊墩果酸含量。
2結果與分析
2.1方法學考察結果
2.1.1線性關系。由圖1可知,齊墩果酸標準品在5~6min出峰,計算得回歸方程為y=24208x-126.8,r=0.9991。結果表明,齊墩果酸在0.2052~1.0260mg/ml范圍內與峰面積呈良好的線性關系。
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2.1.2精密度。計算得峰面積RSD值為0.58%,表明儀器精密度良好。
2.1.3穩定性。計算得峰面積RSD值為0.89%,表明齊墩果酸在12h內穩定。
2.1.4重現性。計算得RSD值為1.51%,表明樣品處理過程和測定方法均有良好的重現性。
2.1.5回收率。計算齊墩果酸平均回收率為99.8%,RSD值為1.12%。
2.2樣品測定結果棉團鐵線蓮根、莖葉中齊墩果酸測定結果如圖2、3所示。計算得棉團鐵線蓮根中齊墩果酸的平均含量為0.1752%,莖葉中齊墩果酸的平均含量為0.0963%。
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3結論與討論
齊墩果酸為棉團鐵線蓮所含的主要皂苷元,其含量的測定在一定程度上能反映藥材的質量。研究表明,不同產地的棉團鐵線蓮中齊墩果酸的含量也不同,河北產的棉團鐵線蓮齊墩果酸含量較高,遼寧產的較低。該試驗結果表明,吉林通化地區所產的棉團鐵線蓮齊墩果酸含量也較低,其中棉團鐵線蓮的莖葉中齊墩果酸含量略低于根。該測定方法操作簡單、靈敏、重現性好,可用于棉團鐵線蓮中齊墩果酸的含量測定。該研究為評價棉團鐵線蓮莖葉藥用價值提供了參考,為進一步研究開發其藥用資源和質量控制提供了科學依據。
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