1.3性能測試
1.3.1果膠裂解酶活力的測定
反應體系中包括酶稀釋液20,含0.2%聚半乳糖醛酸的甘氨酸。NaOH(0.2mol/L)緩沖液(pH值為9.4,含有0.44mmol/L的CaC1,若測定堿性果膠酶Biopmp3000L和精練酶Scou=yme301L中果膠裂
解酶活力,則采用pH值為11.4的Biftton.Robinson廣泛緩沖溶液)2mL,以活性的酶液作為空白對照,加入含底物的緩沖溶液開始酶促反應,反應條件為45℃,15min,用3mL的0.03mol/L的磷酸終止反應,在235am處測定其吸光度值。一個標準酶活單位
(1U)定義為:每分鐘使聚半乳糖醛酸裂解產生1umol的不飽和聚半乳糖醛酸的酶量。不飽和聚半乳糖醛酸在235am處的摩爾吸光系數(shù)為
4600L/(mol·cm)。
1.3.2果膠裂解產物不飽和半乳糖醛酸的測定
利用果膠裂解酶對底物果膠降解的最終產物通常為不飽和二或三半乳糖醛酸(GA),它具有不飽和共軛體系和還原性的末端(還原性醛基),在紫外區(qū)(235am處)具有特征吸收峰,同時還原性醛基與
DNS發(fā)生顯色反應的產物在540am處也具有特征吸收峰,因此可確定裂解產物在235am處吸光度(OD)和540am處吸光度(OD)之間的關系,最終根據(jù)OD。半乳糖醛酸質量濃度標準曲線確定裂解產物中半乳糖醛酸質量濃度(C。)與OD2,的關系:CGA=105.4X吸光度+1.7458,單位為~g/mL。以空白樣中溶液調零,取1mL精練液加入5mL磷酸終止液中,在235am波長下,1cm石英比色皿測定吸光值(若吸光值大于1,則稀釋10倍),精練浴中半乳糖醛酸的質量濃度C。=6Xc。。同時按DNS顯色法”測定其在540am處的吸光度。
1.3.3織物失重率
將精練前后的織物分別在恒溫恒濕箱中(溫度20℃,相對濕度65%)平衡24h后稱量,質量分別為m1和m2,精練后織物失重率=(ml—m2)Im1×100%。
1.3.4毛效
按標準定時法(30min)測定毛效。
1.3.5果膠去除率
按硫酸銨萃取一咔唑比色法定量織物的果膠含量。果膠去除率y的計算公式:
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2結果與討論
2.1 pH值
酶分子上有許多酸性和堿性的氨基酸側鏈基團,要使酶具有活性,這些基團必須有特定的解離形式。隨著pH值的變化,具有催化活性的離子基團在總酶量中所占的比例不同,因而使酶的催化能
力也不同。同樣受pH值控制的底物基團(包括與酶分子結合的基團和反應基團)的解離狀態(tài)也會影響酶解反應的效率。另外,酶是一種蛋白質,只有在一定的pH值范圍內才穩(wěn)定,否則會變性失活,所以每種酶都有它最適宜的pH值,在一定的pH值下,才能達到其活力的最大值。本文選擇不同pH值條件考察了其對自制新型堿性果膠酶降解棉針織物上果膠后產物濃度和失重率的影響,結果如圖1所示。
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