2．1葡萄糖氧化酶的固定
科研工作者已經(jīng)采用不同的方法嘗試將葡萄糖氧化酶固定于多種不溶性的載體如硅膠[24]、絲素膜、活性炭素等[4,25-26]上，但所得固定化葡萄糖氧化酶主要用于制備電化學(xué)生物傳感器．筆者所了解到的最早將葡萄糖氧化酶進(jìn)行固定并用于棉織物漂白的是K．0p-wis等人．[27]349他們分2步將葡萄糖氧化酶固定于棉織物上：(1)將退漿棉織物置于三聚氯氰(2，4，6-三氯-l，3，5-三嗪)和1，4-重氮二環(huán)(2，2，2)辛烷(DABCO)的l，4-二氧雜環(huán)乙烷溶液中，于室溫下攪拌3h。之后用1,4-二氧雜環(huán)乙烷反復(fù)沖洗，并用丙酮萃取6h，徹底除去三嗪和未溶解的DABCO；(2)將風(fēng)干的棉織物浸沒(méi)于葡萄糖氧化酶的硼酗鹽酸緩沖溶液中，于室溫下攪拌1h，然后冷卻、水洗、干燥，即得固定化酶．在漂白時(shí)將固定化酶和游離酶置于漂液中即可，但是由于所用試劑存在極大的安全隱患，因此有必要進(jìn)一步研究．而T．Tzanov等人[4]88,以疏松多孔的氧化鋁和玻璃泡沫顆粒為載體，戊二醛為交聯(lián)劑對(duì)葡萄糖氧化酶進(jìn)行了固定：先將載體于45℃置于4％1-氨丙基三乙氧基硅烷的丙酮溶液中硅烷化，反應(yīng)24h后水洗，干燥后，在室溫下于2％戊二醛水溶液中浸沒(méi)2h，最后將載體置于酶液中，室溫下反應(yīng)16h，多次水洗后即得固定化酶．通過(guò)2種載體固定化酶產(chǎn)生H202的對(duì)比發(fā)現(xiàn)，玻璃泡沫載體比氧化鋁載體好，但是對(duì)于后續(xù)漂白過(guò)程中的攪拌通風(fēng)及堿性等條件抵抗力較差，不利于重復(fù)利用；而氧化鋁載體雖然耐劇烈條件能力較強(qiáng)，但是重復(fù)利用5次之后，酶活急剁下降，因此固定效果也不是很理想，還有待進(jìn)一步研究．
2．2漆酶的固定
漆酶固定工藝對(duì)固定化酶的催化活性有很大的決定作用．采用何種工藝進(jìn)行固定，除了酶的活力，還要考慮最終的催化效果、失活與再生能力、固定化試劑的毒性等因素．更重要的還取決于所使用的固定化載體材料．國(guó)內(nèi)外對(duì)漆酶固定的研究在近些年有不少報(bào)道。所采用的載體有殼聚糖瞄I、海藻酸鈉凝膠1291及PVA[30]等，其中文獻(xiàn)[31]還對(duì)近幾十年來(lái)科研工作者利用不同支撐材料固定漆酶的研究成果進(jìn)行了綜述．目前，固定化漆酶應(yīng)用較為成熟的是在廢水脫色[32-33]方面，因此對(duì)這方面研究中漆酶的固定做一簡(jiǎn)要介紹．A．Kunamneni等人[32]169-170利用環(huán)氧基活化的聚甲基丙烯酸酯基聚合物為載體，將漆酶進(jìn)行共價(jià)固定的研究卓有成效，不但顯著提高了漆酶對(duì)pH、溫度、儲(chǔ)藏時(shí)間的穩(wěn)定性，而且重復(fù)利用17次之后酶活性仍保持在84％．他們將酶制劑DeniLite II S溶解于0．1mol／L醋酸鈉緩沖溶液(pH=4．5)中，通過(guò)離心和過(guò)濾使之最終質(zhì)量濃度為5 g／L，然后用1 mol／L碳酸鈉緩沖溶液將其pH值調(diào)至9．0，放入載體[m(漆酶)：m(載體)=1：10]，于室溫下攪拌反應(yīng)24h，然后過(guò)濾，用0．1mol／L醋酸鈉緩沖溶液清洗，真空干燥即得．WANG Ping等人[33]1520先將漆酶包埋在與聚乙二醇混合的海藻酸鈉／明膠顆粒中(擠入到2．0％的CaCl2溶液中，迅速成形)，在4℃下與交聯(lián)劑戊二醛反應(yīng)2h，然后用0．1mol／L(pH=7．0)磷酸鹽緩沖溶液反復(fù)沖洗顆粒，干燥即得固定化酶．
2．3木聚糖酶的固定
朱啟忠等人曾嘗試采用殼聚糖、海藻酸鈉為載體，結(jié)合微膠囊技術(shù)對(duì)木聚糖酶進(jìn)行固定[34]，但是研究結(jié)果是酶固定率不太理想(39．4％)．而采用共價(jià)結(jié)合法則可以進(jìn)一步提高酶活回收率，但是共價(jià)法通常需要通過(guò)接枝反應(yīng)在載體中引入具有可以與酶反應(yīng)的基團(tuán)．最近A．Sarbu等人[351通過(guò)自由基過(guò)氧化物的激發(fā)將丙烯酰胺接枝到醋酸纖維薄膜上，引入能夠與交聯(lián)劑反應(yīng)的—CONH2，為獲得高酶活回收率的固定化木聚糖酶提供了可能．到目前為止，對(duì)木聚糖酶的固定研究還不多，其在工業(yè)中的應(yīng)用還有待研究．新型生物酶在漂白中的應(yīng)用
3．1葡萄糖氧化酶對(duì)棉織物的漂白
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