2.2漆酶的固定
漆酶固定工藝對固定化酶的催化活性有很大的決定作用.采用何種工藝進行固定,除了酶的活力,還要考慮最終的催化效果、失活與再生能力、固定化試劑的毒性等因素,更重要的還取決于所使用的固定化載體材料.國內外對漆酶固定的研究在近些年有不少報道,所采用的載體有殼聚糖[281、海藻酸鈉凝膠[291及PVAtol等,其中文獻[31]還對近幾十年來科研工作者利用不同支撐材料固定漆酶的研究成果進行了綜述.
目前,固定化漆酶應用較為成熟的是在廢水脫色[32-33]方面,因此對這方面研究中漆酶的固定做一簡要介紹.8印染助劑27卷A.Kunamneni等人[3211∞利用環氧基活化的聚甲基丙烯酸酯基聚合物為載體,將漆酶進行共價固定的研究卓有成效,不但顯著提高了漆酶對pH、溫度、儲藏時間的穩定性,而且重復利用17次之后酶活性仍保持在84%.他們將酶制劑DeniLiteIIS溶解于0.1mol/L醋酸鈉緩沖溶液(pH=4.51中,通過離心和過濾使之最終質量濃度為5g/L,然后用1mol/L碳酸鈉緩沖溶液將其pH值調至9.0,放人載體[m(漆酶):m(載體)=1:1O,]于室溫下攪拌反應24h,然后過濾,用0.1mol/L醋酸鈉緩沖溶液清洗,真空干燥即得.WANGPing等人[33]150先將漆酶包埋在與聚乙二醇混合的海藻酸鈉/明膠顆粒中(擠入到2.0%的CaC1溶液中,迅速成形),在4℃下與交聯劑戊二醛反應2h,然后用0.1mol/L(pH=7.0)磷酸鹽緩沖溶液反復沖洗顆粒,干燥即得固定化酶.
2.3木聚糖酶的固定
朱啟忠等人曾嘗試采用殼聚糖、海藻酸鈉為載體,結合微膠囊技術對木聚糖酶進行固定1,但是研究結果是酶固定率不太理想(39.4%).而采用共價結合法則可以進一步提高酶活回收率,但是共價法通常需要通過接枝反應在載體中引人具有可以與酶反應的基團.最近A.Sarbu等人[35]通過自由基過氧化物的激發將丙烯酰胺接枝到醋酸纖維薄膜上,引入能夠與交聯劑反應的一CONH,為獲得高酶活回收率的固定化木聚糖酶提供了可能.到目前為止,對木聚糖酶的固定研究還不多,其在工業中的應用還有待研究.
3新型生物酶在漂白中的應用
3.i葡萄糖氧化酶對棉織物的漂白
諸多研究表明:用葡萄糖氧化酶代替化學漂白劑來實現對棉織物的生物漂白處理應用前景極好[3-4]不僅在紡織品的印染加工中有所應用,還可將葡萄糖氧化酶加入到洗滌劑中制成日常的洗滌用品[361,對于咖啡、茶漬、紅酒等的去除有特殊效果.GOD對棉織物漂白通常以退漿f淀粉漿料=4%(ow1)]后廢液為原料,如果用淀粉酶退漿,則可以使淀粉分解為葡萄糖,可直接用于葡萄糖氧化酶的催化反應.葡萄糖氧化酶對棉織物的漂白一般分為:f1)在一定條件下用GOD催化葡萄糖氧化,產生足量的H202以滿足漂白的需要;(2)用產生的過氧化氫溶液進行漂白處理.其中,如何保證產生足量的H2o是整個應用過程的關鍵.P.Anis等人I7187~8通過研究影響產生HO量的因素(如GOD用量、pH值、溫度、處理時間、葡萄糖用量)得出了最佳工藝:pH4.1(醋酸調節)、GOD[酶活10U/g,用量0.O1%(owf)1、55℃處理45min、葡萄糖用量4024mg/L.采用此法產生的H202質量濃度為800~1000mg/L.T.Tzanov等人在研究中還發現,通風條件對過氧化氫的產量起著很關鍵的作用[313,因為在反應過程中需要有氧氣的參與.在對漂白應用的研究方面,通過對酶法漂白和傳統化學試劑漂白效果的比較,以CIE白度為指標,得出了合理的漂白工藝,結果如表1所示.
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