CMC粘度法是纖維素酶活力檢測的方法之一,作者用它測定了一批市售纖維素酶的活力,又分別用SBDI-A和Cellusoft L酶進行了多項工藝測試,在此基礎上提出;在織物處理過程中酶對纖維素纖維有較多的吸著,隨著處理時間的延長,酶的作用力逐漸減弱直至完全衰竭,并認為CMC粘度法是一個簡易可靠值得推薦的活力定量檢測方法,它可以用來評價酶的力份,測定酶的儲存穩性定,用以篩選酶的增效劑和抑制劑,可以用來測定酶處理反應,為制訂工藝配方提供科學依據。
關鍵詞 纖維素酶 織物酶處理 分析測試方法
1.織物處理用纖維素酶及其活力測試研究
1.1 酶的活力測試方法現狀:
纖維素酶是由霉菌等培養得到的一個自然的多組份混合物,它的生物催化作用可以使纖維素纖維發生水解,有效地控制水解速度和水解率可以得到纖維素纖維織物的不同處理要求,纖維素酶對纖維素纖維的作用分四個程序;滲入,內切,外切,糖化。
滲入決定于酶的分子量大小和纖維的內表面可及度,內切(在任意部位把纖維素苷鍵切斷)主要決定于組份中Cx酶的活力,外切(在纖維素的一端順序切下一個個雙糖)主要決定于C1酶的活力,糖化決定于把多糖轉化為單糖的葡萄糖酶Co的活力。多種組分的各自活力和協調構成了單位時間內纖維素纖維的降解糖化量,酶的活力測定對織物酶處理工藝設計有重要意義。
酶的活力測定,有稱作催化活力測定,測定方法有;濾紙崩潰法,總糖比色法,粘度法等。濾紙崩潰法屬于定性檢測,總糖比色法重點反映C1與Co的協調作用,粘度法重點反映Cx與C1的協調作用,兩者都可以用作定量測定。至今活力測定尚未有統一的方法,表示活力大小的計量單位更是多種多樣,丹麥NOVODISK(諾和諾得公司)早期采用總糖比色法(AF187.2/1-GB82-08-10)一分鐘水解產生1μmol葡萄糖稱為一個NCU活力單位(NCU=NOVOCellulase Unit)。后來又采用粘度法(AF275/1-GB1989-02-03)用一種活力為880EGU的內切葡聚糖酶,以其作用于CMC的粘度曲線為對比標準,測得的對應值以EGU/克作為一個內切酶活力單位(EGU=EndoGlucase Unit)。
紡織染整行業應用酶處理技術已有多年,但還沒有建立起酶的活力測定方法,無法檢出酶商品的好壞,不能檢查酶的儲存穩定性,失去了制訂酶處理工藝配方的科學依據。對于使用廠來說,迫切需要有一個簡便的,統一的,實用的工藝檢測方法。有鑒于此,二年多來我們在測試方面做了一些探索,現在可以認為;采用一般的CMC粘度測試法,以CMC的濃度— 粘度關系曲線作為對應,定出酶的活力計算單位。可以用作對酶商品的考核,現將具體內容介紹如下;
1.2 CMC粘度法的檢測方法以及有關活力的概念
1.2.1 測試儀器與方法
使用儀器:NDJ-1Rotational Viscometer 上海天平儀器廠
計算公式:(1/V1-1/Vo)×1000/10(分鐘)
相對活力含義:在30℃水溶液中,一克酶作用于20克CMC,反應十分鐘,相當于有10克CMC水解時,其相對活力為100。
1.2.2 具體操作
取醚化度為85%的CMC,加水制糊配成1%的溶液,取纖維素酶加水配成1克/升的溶液,HAC 0.2M三者按2∶1∶1混合(即15ml∶7.5ml∶7.5ml。中性酶則不加醋酸液,以水代之),在30℃條件下反應十分鐘,在回轉式粘度計上,用轉子,轉速6RPM,注入混合液20ml。
酶活=(1/V1-1/Vo)×10000/10(反應時間“分”)
Vo=不加酶的CMC混合液粘度
V1=加酶后的CMC混合液粘度
1.2.3 CMC的濃度-粘度相關曲線(值)

計算:
粘度7.5時,活力=(1/7.5-1/30)×10000/10=100
當樣品混合液的粘度與CMC濃度減半時的數值相同時,活力指標即為100。
1.3測試數據(隨機采樣):
1996.1.4測定
1995.9.29測定
1995.6.28測定

1995.3.1測定

1993.10測定

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