含染料廢水的色度脫除一直是印染行業和染料工業所面臨的重大問題之一。我國作為世界上染料生產和使用的主要國家,該類廢水的污染尤為嚴重。近20年來,先后有多種物理、化學和生物的方法被用于含染料廢水的脫色處理。其中生物強化處理技術,即通過篩選或構建具有高效降解或吸附性能的特定微生物菌株用于含染料廢水的處理和脫色,因顯示出經濟、高效、適于大規模廢水處理等特點,更是受到人們的極大關注。但這些研究大多為純培養單菌株對單一染料的脫色作用。而實際的含染料廢水中往往含有多種染料,來自生產過程的有色廢水中還含有各種染料中間體。另一方面,單菌株也難以完成對廢水中所有染料及其中間體的脫色作用。因此考察多菌株的聯合作用對混合染料的處理和脫色具有重要的理論和實際意義。本文考察了在單菌株純培養條件下,溴氨酸降解菌BX26或高效廣譜吸附菌GX2對由活性艷藍KNR和其中間體溴氨酸組成的混合染料的脫色行為;在此基礎上,進一步考察了BX26和GX2的聯合作用對單溴氨酸、單KNR以及溴氨酸和KNR的混合染料的脫色性能,同時考察了作用過程中兩菌株的數量消長和種群變化。
材料和方法
1 菌株:溴氨酸降解菌BX26(黃桿菌屬)和高效廣譜吸附菌GX2(青霉菌屬)。
2 培養基:可溶性淀粉,10g;NaCl,0.5g;KNO3,1g;K2HPO4·3H2O,0.5g;MgSO4·7H2O,0.5g;FeCl3,10mg;H2O,1000mL;pH7.5±0.1。在考察單一染料的脫色時,培養基中加入單種溴氨酸或KNR染料,濃度為120mg/L;在考察混合染料的脫色時,培養基中同時加入溴氨酸和KNR,濃度均為120mg/L。
3 培養方法:BX26種子液為培養36h的BX26培養液;GX2種子液為用50mL無菌水沖洗GX2斜面而制成的孢子懸濁液。兩種子液均按5%的接種量接種于含有40mL染料培養液的150mL錐形瓶中,即向每瓶中加入2mL種子液。在考察單菌株的脫色作用時,接入單BX26或單GX2菌;在考察菌株的聯合作用時,同時接入BX26和GX2,接入比例分別為2mL BX26和0.1mL GX2、2mL BX26和2mL GX2、0.1mL BX26和2mL GX2。將接入菌體的染料培養液搖床培養(120rpm,30℃)。
4染料濃度的測定:每24h取樣1mL,10000rpm下離心15min后測定上清液吸光度。單一溴氨酸和KNR吸光度的測定分別在其最大可見光區吸收波長485和600nm處進行。混合染料的測定則是分別在485nm和600nm處測定上清液吸光度,并按下式計算混合染料中溴氨酸和KNR的吸光度:AKNR , 600nm = A混合染料, 600nm;A溴氨酸,485nm = A混合染料,485nm - 0.269×AKNR, 600nm。再借助工作曲線計算各染料濃度。
5 菌體生長的測定:BX26的生長測定采用涂布平板法,培養基用LB培養基。GX2的生長測定方法如下:脫色實驗結束后,3000rpm離心15min收集菌體并用去離子水洗滌6次,置于50℃烘箱中烘至恒重,用電子天平測菌體干重。
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