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2、 基于糖醛衍生物法的檢測(cè)方法

基于糖醛衍生物法的檢測(cè)方法主要是由于糖類化合物在濃酸中可以分解形成糖醛化合物，由于糖醛含量與棉纖維中的糖分濃度存在線性關(guān)系，通過分光法或者紫外分光法可以對(duì)其進(jìn)行定量研究。該方法可操作性強(qiáng)，是目前國內(nèi)測(cè)試棉纖維含糖量的主流方法。

2.1 3,5-二羥基甲苯-硫酸法。Sisman等[17]發(fā)現(xiàn)，3,5-二羥基甲苯濃硫酸可將棉纖維中單糖和多糖分解成為糖醛衍生物，形成明顯的紅色絡(luò)合物，根據(jù)糖分濃度的不同，顯色程度由深到淺，可通過分光光度計(jì)進(jìn)行測(cè)試。我國行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)SN/T 0311.1-94《進(jìn)出口棉纖維含糖檢驗(yàn)方法 定量法》[18]和國家標(biāo)準(zhǔn)GB/T 16258-2008《棉纖維 含糖試驗(yàn)方法 定量法》[19]中關(guān)于棉花含糖量的測(cè)試也是基于此原理。

2.2 烯醇化UV法。徐?等[20]人通過將棉纖維中果糖、葡萄糖、蔗糖在酸性或堿性溶液中進(jìn)行烯醇化反應(yīng)，生成羥甲基糖醛。而經(jīng)過濃酸脫水后的羥甲基糖醛含量與果糖、葡萄糖和蔗糖溶液的濃度存在線性關(guān)系，通過UV法，利用棉纖維水溶液中糖類脫水后生成物的吸光度的差異，通過數(shù)學(xué)計(jì)算確定棉纖維總糖量的測(cè)定方法。

3 、紅外光譜法

近年來紅外光譜法是通過以Perkins法為基礎(chǔ)，用棉纖維中的還原糖去還原Cu2+，再通過紅外光譜儀測(cè)出棉纖維在特定波長的吸收值，從而得出不同含糖濃度的吸收值。以含糖量為橫坐標(biāo)，吸收值為縱坐標(biāo)，會(huì)出校準(zhǔn)曲線，然后測(cè)定未知樣品在特定波長處的吸收值。我國張慧云[21]等也有相類似的研究。該方法結(jié)合Perkins[2]法的優(yōu)點(diǎn)，比較簡(jiǎn)單、快速，但機(jī)器成本過高，不利于廣泛推廣。

4 、高效液相色譜法(HPLC)

高效液相色譜法通過配置棉纖維中所包含的各類糖的標(biāo)準(zhǔn)溶液，再通過對(duì)棉纖維溶液進(jìn)行萃取，再經(jīng)過高效液相色譜儀器進(jìn)行測(cè)定，可以定量計(jì)算出棉纖維的實(shí)際總含糖量。Gray等[22]利用高壓液相色譜測(cè)定棉花的含糖量。他通過對(duì)棉纖維進(jìn)行水萃取，然后利用Spherisob S5NH分離柱, 示差折光檢測(cè)器對(duì)水萃取溶液中的糖進(jìn)行分離測(cè)定, 從而得出棉纖維的含糖量。此方法不用預(yù)先對(duì)糖分進(jìn)行衍生化，可對(duì)多種糖進(jìn)行測(cè)定。我國王琨等人[23]經(jīng)二次水浸提棉纖維，提取液經(jīng)濃縮、定容后，通過串聯(lián)氨基鍵合柱，配制葡萄糖、乳糖、纖維二糖、蜜二糖、松三糖等糖標(biāo)準(zhǔn)溶液，通過高效液相色譜法得出棉纖維的總含糖量。該方法是一項(xiàng)高效、精確的測(cè)定棉纖維中各類單糖的測(cè)試方法，但由于測(cè)試方法比較費(fèi)時(shí)，且對(duì)儀器條件有所要求，不易于推廣[12]。

5、 基于生物酶的檢驗(yàn)方法

這類方法主要利用生物酶的氧化和脫氫特性，與棉纖維萃取出來的葡萄糖進(jìn)行反應(yīng)，從而測(cè)得棉纖維中葡萄糖的實(shí)際含量。但這類方法只對(duì)葡萄糖敏感，而對(duì)其它糖分無法測(cè)量[24]。

5.1 葡萄糖氧化酶法。利用葡萄糖氧化酶與萃取液中的葡萄糖反應(yīng)，生成一種葡萄糖酸過氧化氫，隨后過氧化氫與一種無色染料反應(yīng)，將染料氧化成綠色，顏色的亮度與最初存在的葡萄糖的量成正比，因此可以通過顏色亮度來確定含糖的多少。

5.2 δ-磷酸葡萄糖脫氫法[25]。將棉纖維制成水提取物后，通過酶制劑的作用下，使其單糖和雙糖轉(zhuǎn)化為δ-磷酸葡萄糖，然后在δ-磷酸葡萄糖脫氫酶的作用下，形成煙酰胺腺嘌呤二核苷酸(NADPH)。NADPH可以通過紫外分光光度計(jì)在波長960nm處吸收值測(cè)定，由于棉纖維中糖分與NADPH的量成比例關(guān)系，從而可以測(cè)得棉纖維的含糖量。

綜上所述，我們可以看出上述幾種測(cè)定棉纖維含糖量的方法都有各自的優(yōu)缺點(diǎn)，隨著科技的發(fā)展，檢測(cè)技術(shù)和手段的不斷推陳出新，棉纖維含糖量的測(cè)試方法也將朝著快速、便利、準(zhǔn)確且低成本的方向發(fā)展。