含染料廢水的色度脫除一直是印染行業和染料工業所面臨的重大問題之一。我國作為世界上染料生產和使用的主要國家,該類廢水的污染尤為嚴重。近20年來,先后有多種物理、化學和生物的方法被用于含染料廢水的脫色處理。其中生物強化處理技術,即通過篩選或構建具有高效降解或吸附性能的特定微生物菌株用于含染料廢水的處理和脫色,因顯示出經濟、高效、適于大規模廢水處理等特點,更是受到人們的極大關注。但這些研究大多為純培養單菌株對單一染料的脫色作用。而實際的含染料廢水中往往含有多種染料,來自生產過程的有色廢水中還含有各種染料中間體。另一方面,單菌株也難以完成對廢水中所有染料及其中間體的脫色作用。因此考察多菌株的聯合作用對混合染料的處理和脫色具有重要的理論和實際意義。本文考察了在單菌株純培養條件下,溴氨酸降解菌BX26或高效廣譜吸附菌GX2對由活性艷藍KNR和其中間體溴氨酸組成的混合染料的脫色行為;在此基礎上,進一步考察了BX26和GX2的聯合作用對單溴氨酸、單KNR以及溴氨酸和KNR的混合染料的脫色性能,同時考察了作用過程中兩菌株的數量消長和種群變化。
材料和方法
1菌株:溴氨酸降解菌BX26(黃桿菌屬)和高效廣譜吸附菌GX2(青霉菌屬)。
2培養基:可溶性淀粉,10g;NaCl,0.5g;KNO3,1g;K2HPO4·3H2O,0.5g;MgSO4·7H2O,0.5g;FeCl3,10mg;H2O,1000mL;pH7.5±0.1。在考察單一染料的脫色時,培養基中加入單種溴氨酸或KNR染料,濃度為120mg/L;在考察混合染料的脫色時,培養基中同時加入溴氨酸和KNR,濃度均為120mg/L。
3培養方法:BX26種子液為培養36h的BX26培養液;GX2種子液為用50mL無菌水沖洗GX2斜面而制成的孢子懸濁液。兩種子液均按5%的接種量接種于含有40mL染料培養液的150mL錐形瓶中,即向每瓶中加入2mL種子
4染料濃度的測定:每24h取樣1mL,10000rpm下離心15min后測定上清液吸光度。單一溴氨酸和KNR吸光度的測定分別在其最大可見光區吸收波長485和600nm處進行。混合染料的測定則是分別在485nm和600nm處測定上清液吸光度,并按下式計算混合染料中溴氨酸和KNR的吸光度:AKNR,600nm=A混合染料,600nm;A溴氨酸,485nm=A混合染料,485nm-0.269×AKNR,600nm。再借助工作曲線計算各染料濃度。
5菌體生長的測定:BX26的生長測定采用涂布平板法,培養基用LB培養基。GX2的生長測定方法如下:脫色實驗結束后,3000rpm離心15min收集菌體并用去離子水洗滌6次,置于50℃烘箱中烘至恒重,用電子天平測菌體干重。
結果與討論
1在溴氨酸降解菌BX26純培養條件下,混合染料中溴氨酸和KNR的脫色行為:在單一染料和混合染料中,溴氨酸脫色行為大致相同:染料都從24h啟動脫色,72h接近完全脫色,這說明KNR的存在對BX26對溴氨酸的降解脫色沒有任何影響,BX26可以有效地去除混合染料中的溴氨酸。KNR的脫色行為在單一染料和混合染料中也大致相同:48h內染料濃度沒有變化,48h后出現微弱下降,這是由于BX26對KNR的微弱吸附所致。對BX26離心后,確發現BX26菌體表現出KNR的藍色。
2在高效廣譜吸附菌GX2純培養下,混合染料中溴氨酸和KNR的脫色行為:在單一染料和混合染料下,溴氨酸均表現出較大程度的脫色:96h單一染料中的溴氨酸脫色率為76%,混合染料中的溴
在單一染料和混合染料中,96h的KNR脫色率均超過95%,表現了GX2對KNR良好的吸附脫色能力。雖然在混合染料中存在著KNR與溴氨酸的吸附競爭,但由于KNR在競爭中占有明顯優勢,因此溴氨酸的存在對GX2對KNR的吸附影響不大。故混合染料中KNR的吸附脫色率較之單一染料時也只有微弱下降。另外還需指出的是,雖然GX2對混合染料中溴氨酸和KNR的吸附率表現出一定的差異,但混合染料中高達95%的KNR脫色率和66%的溴氨酸脫色率表現了GX2對混合染料卓越的吸附脫色能力和良好的應用前景。
3單菌株純培養和多菌株混合培養對單一染料的脫色作用比較:混合培養中(接種量為2mL BX26+2mL GX2)溴氨酸的脫色行為與單BX26純培養大致相同:24h啟動脫色,48h脫色率超過85%,72h接近100%。這說明混合培養中溴氨酸的脫色機理在于BX26對它的生物降解。而混合培養中溴氨酸48h高達95%的脫色率顯示混合培養較之單BX26培養可能更有利于溴氨酸的降解脫色。相比之下,GX2純培養對溴氨酸的脫色速率和脫色率都要小的多,96h脫色率僅為76%,這顯示降解菌BX26具有比吸附菌GX2更好的溴氨酸脫色能力。
對于KNR染料,單BX26純培養表現出最差的脫色性能,96h脫色率僅為18%,這是由于BX26對KNR只有微弱的吸附之故。而混合培養對KNR也表現出相當低的脫色能力,96h的脫色率僅為37%;GX2純培養表現出最佳的KNR去除脫色能力,72h脫色率達96%。這是因為在混合培養中,BX26和GX2之間存在著對營養、空間等的競爭,而且由于真菌的生長較細菌慢,GX2在營
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